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F – Canine placenta: A promising potential source of highly proliferative and immunomodulatory mesenchymal stromal cells?

Nathalie Saulnier, Julia Loriau, Marine Febre, Clément Robert, Rodolphe Rakic, Tancrède Bonte, Samuel Buff, Stéphane Maddens. Veterinary Immunology and Immunopathology. 2016.

En médecine vétérinaire, les cellules stromales mésenchymateuses thérapeutiques (CSM) ont été traditionnellement isolées à partir de moelle osseuse ou de tissus adipeux adultes. Les tissus néonataux, expulsés à la naissance de toutes les espèces, sont devenus une source alternative de cellules pour la médecine régénérative en médecine humaine. Ces cellules ont été décrites comme étant plus primitives, prolifératives et immunosuppressives que leurs homologues adultes.

Notre objectif était d’examiner si ceci est également avéré chez les chiens. Il existe peu d’informations concernant la caractérisation des CSM néonatales canines. Dans cette étude, nous avons pu à la fois isoler, phénotyper et évaluer la différenciation et les propriétés immunomodulatrices des CSM à partir des annexes fœtales canines, ce qui nous a permis de comparer leurs caractéristiques à celles de leurs « cousines » plus connues issues ​​de la moelle osseuse (Bone-Marow BM). Les tissus néonataux, y compris l’amnios (AM), le placenta (PL) et la matrice du cordon ombilical (UCM) ont été collectés à partir de 6 césariennes canines. Les cellules primaires ont été développées in vitro pendant 5 passages consécutifs et leur prolifération a été mesurée. Les BM-CSM ont été isolés de 5 chiens témoins euthanasiés à partir d’autres études et cultivés in vitro en utilisant un protocole identique. Toutes les lignées de CSM ont été systématiquement évaluées pour leur capacité à se différencier en 3 lignées mésodermiques (adipocyte, ostéocyte et chondrocyte) et phénotypées par cytométrie et qPCR. De plus, l’activité enzymatique du marqueur immunomodulateur clé indoleamine 2,3-dioxygénase (IDO) a été évaluée pour chaque lignée CSM. Les CSM présentant une apparence fibroblastique ont été cultivées avec succès à partir de tous les tissus néonataux. PL-CSM a présenté des taux de prolifération significativement plus élevés que AM- et UCM-CSM (p = 0,05). L’analyse cytométrique a montré que toutes les CSM expriment CD90, CD29 et CD44, alors qu’aucune expression de CD45, CD34 et MHC2 n’a été détectée. Le profil moléculaire a montré l’expression de CD105 et CD73 chez toutes les CSM. De faibles niveaux d’ARNm de Sox2 ont été observés dans toutes les CSM, alors que ni NANOG, ni OCT4 n’ont été détectés. Toutes les CSM se différencient en 3 lignées mésodermiques. Suite à une stimulation inflammatoire, l’activité de l’enzyme immunomodulatrice IDO était significativement plus élevée pour les CSM néonatales par rapport à BM-CSM (p = 0,009).

Nos résultats montrent que les cellules d’annexes foetales canines partagent des propriétés très similaires à leurs équivalents adultes, mais lors de la stimulation elles montrent une activité immunomodulatrice IDO significativement plus élevée. Des études supplémentaires seront nécessaires pour confirmer les bénéfices thérapeutiques potentiels de ces cellules.

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